Élucidation de l'impact de l'infection par le virus Herpès Simplex 1 sur le nucléole

Lymberopoulos, Maria (2010). Élucidation de l'impact de l'infection par le virus Herpès Simplex 1 sur le nucléole Thèse. Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Doctorat en virologie et immunologie, 159 p.

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Résumé

Le gène UL24 est conservé dans la famille des Herpesviridae, mais peu est connu sur sa fonction. UL24 du virus herpès simplex 1 (VHS-1) est importante pour la réplication efficace du virus en culture cellulaire, et aussi pour la réplication dans les neurones et la réactivation dans un modèle animal. UL24 est exprimée tardivement lors de l'infection et par fractionnement, il a été déterminé que cette protéine se localise au noyau et au cytoplasme. Notre hypothèse de départ était que UL24 est une protéine multifonctionnelle dont la fonction varie selon sa localisation dans la cellule. Nous avons déterminé par des essais d'immunofluorescence indirecte sur des cellules infectées que la localisation de UL24 change au cours de l'infection. Cette protéine virale se local ise de manière transitoire dans les nucléoles et par la suite se retrouve plutôt en périphérie du noyau. Ce résultat renforce l'hypothèse que UL24 pourrait jouer différents rôles lors de la réplication du virus dont un effet au niveau du nucléole. L'infection par le VHS-1 induit plusieurs changements morphologiques et fonctionnels au nucléole, mais peu est connu sur le sort des protéines nucléolaires. Nous avons identifié au moins deux groupes de modifications induites au nucléole par le VHS-1 : UL24-indépendantes et UL24-dépendantes. Nous avons déterminé que deux composantes de la machinerie cellulaire pour la transcription par l'ARN polymérase 1 (A RN poli), UBF et RPA 194, sont redistribuées ensembles par le VHS-1 et de manière indépendante de l'expression de UL24. La fibrillarine se retrouve aussi dans cette catégorie mais le mécanisme impliqué dans sa relocalisation semble différer de celle de UBF. La réduction de la synthèse des ARNr décrite lors de l'infection pourrait être expliquée par la redistribution de ces composantes de I'ARNpoll . Bien que UBF est redistribué dans les compartiments de réplication viraux pendant l'infection, nous n'avons pas détecté de points de UBF tôt dans l'infection aux sites de synthèse de l'ADN viral. Ces résultats suggèrent que UBF pourrait ne pas être requis pour la synthèse de l'ADN viral tôt dans l'infection, mais pourrait y être i mpliqué dans un stade plus tardif. Puisque UL24 se localise au nucléole pendant l'infection, notre deuxième hypothèse était que UL24 affecte la composition de ce compartiment et q ue le VHS-1 modifie le nucléole afin de favoriser sa réplication. Nous avons démontré que la nucléoline et 823 sont dispersés pendant l'i nfection et que cette modification est dépendante de l'expression de UL24. Comme pour la nucléoline, nous avons démontré que UL24 est suffisante pour induire la redistribution de 823 dans des essais de transfection transitoire, et que cette fonction est contenue dans le domaine N -tenninal, qui est la portion conservée de UL24. De plus, des analyses mutationnelles ont révélé que le motif d'endonucléase de UL24 semble être important pour la dispersion de 823 dans des cellules infectées et transfectées. L'analyse par microscopie électronique de cellules infectées a révélé que U L24 est importante pour la sortie efficace des nucléocapsides du noyau. Puisqu'il a déjà été démontré que la nucléoline est importante pour la sortie efficace des nucléocapsides du noyau, U 24 pourrait jouer un rôle sur cette étape de la réplication virale via son effet sur la nucléoline. Nos résultats suggèrent donc que les modifications induites au nucléole par UL24 pourraient être importantes pour la réplication optimale du VHS-1 .

Type de document:	Thèse Thèse
Directeur de mémoire/thèse:	Pearson, Angela
Mots-clés libres:	vhs
Centre:	Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt:	13 févr. 2013 19:30
Dernière modification:	07 déc. 2020 15:09
URI:	https://espace.inrs.ca/id/eprint/247

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