Nouvelle approche de thérapie génétique ciblant l’expression d’ICAM-1

Ochietti, Benoit (2002). Nouvelle approche de thérapie génétique ciblant l’expression d’ICAM-1 Thèse. Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Doctorat en virologie et immunologie, 208 p.

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Résumé

ICAM-1 joue un rôle crucial dans le recrutement leucocytaire lors des processus inflammatoires et dans le processus de la présentation d'antigène. ICAM-1 représente donc une cible thérapeutique de choix dans la lutte contre plusieurs maladies inflammatoires et néoplasiques. Les premiers outils thérapeutiques étaient basés sur l'utilisation d'anticorps monoclonaux dans le but de bloquer l'activité d'ICAM-1. Cependant 1'échec des thérapies à base d'anticorps force le développement de moyens alternatifs dans le but de contrôler l'activité d'ICAM-1. La thérapie génique permettrait de moduler l'expression ou l'inhibition de l'expression d'ICAM-1 dans un organe ou compartiment biologique ciblé. Actuellement, les transporteurs d'ADN, à base de virus ou de liposomes, considérés dans les essais cliniques, n'ont pas encore permis d'obtenir des résultats positifs, ce qui est notamment dû aux limitations intrinsèques de ces technologies : toxicité, agrégations, réactions immunitaires, etc. Cette situation pousse 1'industrie à tenter de développer de nouveaux outils, aussi bien dans l'amélioration des molécules d'antisens que dans le design de nouvelles stratégies de formulation transporteurs-ADN. Ces nouveaux types de transporteurs devront être peu toxiques, permettre une biodistribution de 1'ADN vers un organe ciblé, être simples à synthétiser et de façon économique. Ainsi, Supratek Pharma inc. a développé un nouveau concept de transporteurs qui permettraient la formation de complexes stables et solubles en milieu aqueux. Ces transporteurs sont basés sur l'attachement de plusieurs blocs possédant des propriétés physicochimiques désirées. La présente étude avait pour buts d'étudier ces transporteurs, les copolymères ionomériques en bloc, pour le transport de molécules d'ADN in vitro et in vivo, et de les valider dans des modèles touchant l'expression d'ICAM-1 chez la souris. Les résultats ont démontré que les polymères ionomériques en bloc permettaient une transfection d'oligonucléotides dans des cellules in vitro et leur accumulation dans différents organes in vivo. L'un de ceux-ci, le PI2080 (PE0(8K)-g-PEI(2K)), a permis une transfection des cellules in vitro à un niveau égal ou supérieur à la lipofectine, un transporteur commercial. Suivant l'injection i.v. dans les souris, ce complexe s'est accumulé préférentiellement dans les reins. De plus, un oligonucléotide antisens anti­ ICAM-1 a conservé son activité inhibitrice dans cet organe en bloquant l'expression Xl d'ICAM-1 suivant une injection i.p. de LPS. Un autre polymère, le P85PEI (P85-g­ PE1(2K)), bien qu'ayant une activité de transfection plus faible que la lipofectine in vitro, a permis l'accumulation d'un oligonucléotide dans le foie tout en évitant presque complètement les reins. Dans le cas du transport de plasmide, le P123PEI complexé à un vecteur d'expression codant pour ICAM-1, a permis une expression d'ICAM-1 dans le foie de souris ICAM-1 déficiente. De plus, cette expression a déclenché le recrutement de neutrophiles dans le foie. Cette observation peut être intéressante à exploiter en permettant le recrutement de cellules effectrices dans un organe ciblé. Une autre partie du projet a porté sur l'étude des isoformes d'ICAM-1 et leur activité possible chez des souris injectées au LPS. Les résultats ont démontré l'absence d'isoformes dans le foie des souris C57BL/6 et des ICAM-1-déficientes JCGR injectées au LPS, mais la présence des isoformes 4-6 et 3-6 d'ICAM-1 dans le cas des souris ICAM-1-déficientes Tm1Bay. Une infiltration de neutrophiles a également été observée dans ces dernières, ainsi qu'une sensibilité au choc septique induit par le LPS. Ces résultats suggèrent une activité possible des isoformes d'ICAM-1 dans des processus biologiques. En conclusion, les résultats de ces études ont démontré le potentiel des polymères ionomériques en bloc pour le transport d'ADN in vivo et d'en altérer la biodistribution. Le ciblage de l'activité d 'ICAM-1 par thérapie génique est possible en utilisant ce type de transporteur. Finalement, les isoformes d'ICAM-1 peuvent avoir une activité biologique et dont leurs fonctions restent à démontrer. lls permettraient probablement des voies alternatives d'activation et de recrutement cellulaire.

Type de document:	Thèse Thèse
Directeur de mémoire/thèse:	St-Pierre, Yves
Co-directeurs de mémoire/thèse:	Alakhov, Valery (Supratek Pharma)
Mots-clés libres:	therapie ; genique ; icam-1
Centre:	Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt:	16 sept. 2015 15:25
Dernière modification:	28 janv. 2021 16:50
URI:	https://espace.inrs.ca/id/eprint/2339

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