Effets d'une exposition hormonale sur l'expression des connexines dans les lignées cellulaires mammaires

Petit, Alexandre (2020). Effets d'une exposition hormonale sur l'expression des connexines dans les lignées cellulaires mammaires Mémoire. Québec, Université du Québec, Institut national de la recherche scientifique, Maîtrise en sciences expérimentale de la santé, 94 p.

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Résumé

La communication intercellulaire par les jonctions gaps est nécessaire pour le développement et la régulation de la glande mammaire. Les connexines (Cxs) sont des constituantes essentielles du réseau de communication cellulaire. En formant les jonctions gaps, elles permettent le passage de petites molécules entre le cytoplasme de cellules adjacentes. Il a été démontré que l’expression des Cxs et les interactions protéiques qu’elles forment avec les autres protéines jonctionnelles varient au cours du développement, vraisemblablement en fonction des besoins développementaux et fonctionnels du tissu. Ces changements apparaissent principalement pendant la grossesse et semblent similaires aux pics hormonaux observés durant cette même période.

L’hypothèse de cette étude était que l’expression des connexines est influencée par les variations hormonales présentes durant le développement de la glande mammaire. L’objectif principal de cette étude a donc été d’étudier l'influence d’une exposition hormonale sur l'expression des Cxs dans des lignées cellulaires de glande mammaire humaine.

Pour ce faire, des traitements hormonaux (prolactine, ocytocine, progestérone et estrogène) ont été effectués sur des lignées cellulaires humaines non-tumorigéniques (MCF-10A) et cancéreuses (T47D), et l’expression des Cxs a été vérifiée au niveau protéique et transcriptionnel.

Les expositions ont été réalisées à des concentrations basées sur les doses physiologiques humaines, et suggèrent que l’expression des Cxs est médiée par certaines hormones. La Cx43, en particulier, semble avoir son expression diminuée par la prolactine et augmentée par l’estradiol au niveau protéique. L’augmentation par la prolactine de la protéine Cx43 se retrouve également au niveau transcriptionnel par une diminution de l’expression des niveaux de transcrits du gène de la Cx43, GJA1. Une étude préliminaire sur la voie de signalisation reliée aux récepteurs à la prolactine PrlR a également conforté nos résultats.

Bien que les résultats pour les trois autres connexines n’ont pas donné de résultats concluants, de nombreuses optimisations de protocoles, de méthodes et d’analyses ont été effectuées durant ce projet, et permettront d’investiguer plus aisément les Cxs, de comprendre leur rôle dans la glande mammaire ainsi que leur implication dans le cancer du sein.

Intercellular communication through gap junctions is necessary for the development and regulation of the mammary gland. Connexins (Cxs) are essential constituents of the cellular communication network. By forming gap junctions, they allow the passage of small molecules between the cytoplasm of adjacent cells. It has been shown that the expression of Cxs and the protein interactions they form with other junctional proteins varying during development, presumably depending on the developmental and functional needs of the tissue. These mainly during pregnancy and the hormonal changes similar to the pictures seen during this same period.

The hypothesis of this study was that the expression of connexins was influenced by the hormonal variations present during the development of the mammary gland. The main objective of this study was therefore to study the influence of hormonal exposure on the expression of Cxs in human mammary gland cell lines.

Thereby, hormonal treatments (prolactin, oxytocin, progesterone and estrogen) were carried out on non-tumorigenic (MCF-10A) and cancerous (T47D) human cell lines, and the expression of Cxs was verified at the protein and transcriptional level.

Exposures were made at concentrations recommended on human physiological doses, and suggest that Cxs expression is mediated by certain hormones. Cx43, in particular, appears to be influenced by prolactin and estradiol at the protein level. The influence of prolactin on Cx43 is also found at the level of transcription by a decrease in the expression of the levels of transcripts of the Cx43 gene, GJA1. A preliminary study on the signaling pathway linked to the PrlR prolactin receptors also confirmed our results.

Although the results for the other three connexins could not be successfully completed, many optimizations of protocols, methods and analyzes were carried out during this project, and to investigate more to use the Cxs, to understand their role in mammary gland as well as their implication in breast cancer.

Type de document:	Thèse Mémoire
Directeur de mémoire/thèse:	Plante, Isabelle
Mots-clés libres:	Connexines; Cancer; Hormone; Communication; Interaction; Régulation; Connexins
Centre:	Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt:	01 juill. 2024 13:59
Dernière modification:	01 juill. 2024 13:59
URI:	https://espace.inrs.ca/id/eprint/15787

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