Profils de cytokines dans les tissus épithéliaux et immunitaires de furet infectés par des souches létales ou atténuées de CDV

Bastien, Louis-Etienne (2009). Profils de cytokines dans les tissus épithéliaux et immunitaires de furet infectés par des souches létales ou atténuées de CDV Mémoire. Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Maîtrise en virologie et immunologie, 67 p.

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Résumé

Environ 40 millions de personnes contractent le virus de la rougeole (MV) chaque année et environ 600,000 d'entre elles en meurent. Le MV appartient au genre Morbillivirus dans la famille des paramyxoviridae qui comprend aussi le virus de la maladie de Carré (CDV). L'infection de furets par le CDV reproduit les principales caractéristiques de la rougeole chez 1 'humain, incluant des éruptions cutanées typiques, une forte fièvre, une haute virémic ct une sévère immunosuppression. Cette immunosuppression se manifeste principalement par une sévère leucopénie ct par l'inhibition de la prolifération lymphocytaire et peut mener à des complications graves, notamment des infections bactériennes secondaires ou des désordres neurologiques. Nous avons précédemment montré par PCR en temps réel que les PBMCs d'animaux infectés par la souche sauvage 5804P, létale chez le furet, ne développent pas de réponse de cytokines, tandis que l'infection par des souches atténuées entraîne la régulation à la hausse de 1 'ARNm des interférons (IFNs) et d'autres cytokines. Afin d'évaluer la réponse immunitaire chez des tissus immunitaires et épithéliaux, et pour confirmer les résultats précédents au niveau protéique, nous avons produits des anticorps (Ac) contre plusieurs cytokines du furet, ceux-ci n'étant pas disponibles commercialement. Les cytokines choisies sont des représentants importants des réponses immunitaires innées ct adaptatives, soit les IFNs de type 1 et Il, le facteur nécrosant des tumeurs (TNF)-a et les interleukines (IL)-2, -4 et -6. Les gènes des cytokines ont été insérés dans un vecteur d'expression procaryotique et exprimés chez E. Coli. Une fois purifiées, les protéines bactériennes ont été utilisées pour l'immunisation de lapins. Des poulets ont également été immunisés par des peptides synthétiques choisis pour leur immunogénicité. La réponse des animaux à l'immunisation a été évaluée par « immunoperoxydase monolayer assay » (IPMA) ainsi que par immunobuvardage de type Western. Une fois leur spécificité confirmée, les Ac ont été utilisés pour la coloration immunohistochimique de tissus immunitaires et épithéliaux d'animaux infectés par la souche létale 5804P, ou par une souche atténuée causant néanmoins une maladie sévère. Les profils de cytokines ont été évalués aux jours 7 et 14 post infection, qui correspondent respectivement chez la souche sauvage à l'apparition de manifestations cliniques sévères et à la mortalité. L'expression des cytokines de l'immunité innée s'est avérée importante envers les deux souches du CDV, particulièrement pour la souche sauvage dans les tissus épithéliaux. La forte expression de cytokines proinflammatoires envers cette souche corrèle avec l'observation de manifestations cliniques plus sévères. De plus, une altération de l'immunité adaptative a été observée avec 5804P. Dans les ganglions mésentériques, l'expression des cytokines de la réponse adaptative s'est avérée soit inhibée, pour IFN-y, ou retardée, pour IL-2 et IL-4. Nos résultats démontrent que les morbillivirus interfèrent de façon différente avec l'activation de la réponse innée dans des cellules immunitaires et épithéliales. Ceci suggère une contribution importante des cellules épithéliales au développement d'une réponse immunitaire appropriée ct à la résolution de 1 'infection.

Type de document:	Thèse Mémoire
Directeur de mémoire/thèse:	von Messling, Veronika
Mots-clés libres:	virus ; maladie ; Carre
Centre:	Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt:	10 janv. 2013 20:50
Dernière modification:	18 déc. 2015 16:36
URI:	https://espace.inrs.ca/id/eprint/131

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