Daniel, Claude
(1993).
Immunogénicité et structure antigénique de la protéine de surface du coronavirus murin
Thèse.
Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Doctorat en virologie et immunologie, 235 p.
Résumé
Dans le but d'identifier les déterminants moléculaires responsables de la
pathogénie du coronavirus murin MHV-A59, nous avons étudié l'importance
de la glycoprotéine de surface S dans la réponse immunitaire contre le
coronavirus. Nous avons purifié la glycoprotéine par chromatographie
d'immunoaffinité et analysé son immunogénicité chez la souris BALB/ c. Nous
avons démontré que la glycoprotéine S purifiée pouvait induire la synthèse
d'anticorps neutralisants et protéger les souris contre une épreuve létale avec le
MHV-A59. La structure antigénique de la glycoprotéine S a par la suite été
étudiée. Nous avons analysé, avec des algorithmes de prédiction d'épitopes, la
séquence déduite en acides aminés de la glycoprotéine S. Des peptides
synthétiques ont été sélectionnés et leur immunogénicité vérifiée chez la souris
BALB/c. Aucun nouveau site antigénique biologiquement important n'a été
identifié. Cependant, une grande différence d'immunogénicité a été mise en
évidence entre les peptides couplés à l'albumine sérique bovine et les peptides
couplés à l'hémocyanine de patelle. Finalement, une banque de fragments de la
glycoprotéineS exprimés dans les vecteurs pEX et pET a permis de localiser les
sites de liaison d'anticorps monoclonaux sur la structure primaire de la
protéine S. Un site immunodominant associé à la neutralisation formé
d'épitopes continus a été identifié près de l'extrémité N-terminale de la sousunité
52. De plus, nos résultats suggèrent un mécanisme de neutralisation
impliquant l'induction d'un changement conformationnel. Finalement, nous
avons proposé un modèle reliant topographiquement des sites antigéniques
discontinus aux sites linéaires identifiés dans notre étude.
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