Localisation mitochondriale du facteur de fragmentation de l’ADN (DFF) lors de l’apoptose

Séguin-Grignon, Marie-Noëlle; Johnson, Bruno et Bernier, Jacques ORCID: https://orcid.org/0000-0002-0594-5922 . Localisation mitochondriale du facteur de fragmentation de l’ADN (DFF) lors de l’apoptose In: Journée Phare 2015 (7e édition), 19-20 novembre 2016, Orford (Québec).

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Résumé

Le « DNA Fragmentation Factor » DFF40 est une endonucléase nucléaire intervenant durant l’apoptose. Cependant, nos résultats ont montré qu’une fraction O-glycosylée du DFF40 a une localisation membranaire. De plus, une analyse in silico (MitoProt II) a révélé une séquence de localisation mitochondriale en N-term. Le but de notre étude est donc d’investiguer si le DFF40 se trouve au niveau de la mitochondrie et quelle y serait sa fonction. Premièrement, la localisation a été validée. D’abord, une analyse d’immunofluorescence en microscopie confocal sur des cellules HepG2 a révélé l’augmentation lors de l’apoptose de la colocalisation entre un marqueur mitochondrial (MitoTracker®) et le DFF40. Ensuite, la localisation mitochondriale a été observée en microscopie électronique dans les cellules HepG2 et Jurkat. Deuxièmement, l’altération de la partie N-term de la protéine pour sa localisation mitochondriale a été observée. En effet, la colocalisation est plus faible avec l’anticorps ciblant cette partie comparativement à celle observée avec les deux autres anticorps. De plus, les protéines observées suite à la séparation des fractions cytoplasmique et mitochondriale montrent une protéine clivée nonrésistante à un traitement par la protéinase K. Cela suggère que la protéine clivée se situe dans la membrane externe de la mitochondrie. Bref, plusieurs évidences montrent que le DFF40 possède une localisation mitochondriale augmentée lors de l’apoptose,et que cela est accompagné du clivage de sa séquence N-term. Cependant, sa fonction n’y est pas connue. Notre laboratoire envisage donc de l’investiguer à l’aide d’un modèle cellulaire de « knock-out ».

Type de document:	Document issu d'une conférence ou d'un atelier
Informations complémentaires:	Affiche scientifique no 22
Mots-clés libres:	-
Centre:	Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt:	11 mars 2019 16:05
Dernière modification:	16 févr. 2022 21:03
URI:	https://espace.inrs.ca/id/eprint/7899

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