Leduc, Martin
(1999).
Analyse moléculaire du complexe xylanolytique de steptomyces lividans par dislocation génétique
Mémoire.
Québec, Université du Québec, Institut national de la recherche scientifique, Maîtrise en microbiologie appliquée, 156 p.
Résumé
Streptomyces lividans est une bactérie du sol capable de dégrader la matière
lignocellulosique, dont le xylane. Étant donné la complexité du substrat, cette bactérie
produit une panoplie de protéines permettant l'hydrolyse complète du xylane. Des
expériences de dislocation génétique de certains gènes du complexe xylanolytique de S.
lividans ont été réalisées dans le but d'approfondir le rôle des protéines correspondantes.
Des plasmides intégratifs ont été construits afin de disloquer ces gènes. Peu de
transformants ont été obtenus, mais des souches ayant intégré le plasmide dans les gènes
abjB, bxlR et msiK ont été générées. La souche disloquée en abjB ne produisait plus
d'AbtB, les souches disloquées en msiK avaient une activité xylanasique réduite et le
phénotype des souches disloquées en bxlR était similaire à celui de la souche sauvage.
Des tentatives de délétion chromosomique ou de remplacement des gènes bxlA, bxlR et
bxlS suite à une double recombinaison homologue avec d'autres constructions
plasmidiques ont été infructueuses, mais on permis d'obtenir la souche R4-4 qui semble
avoir subie une amplification d'une portion de son chromosome comprenant le gène bxlA.
Cette souche avait une activité B-xylosidasique spécifique plus de cinq fois supérieure à
celle de la souche sauvage.
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