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Détermination du profil d'expression des isoformes de la galectine-8 dans des lignées cellulaires de cancer du sein

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Dubé Delarosbil, Cherylane (2019). Détermination du profil d'expression des isoformes de la galectine-8 dans des lignées cellulaires de cancer du sein Mémoire. Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Maîtrise en sciences expérimentales de la santé, 91 p.

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Résumé

En utilisant des biopsies provenant de femmes atteintes de cancer du sein de sous-type triplenégatif, une étude menée par notre laboratoire a permis de constater que la localisation nucléaire de la galectine-8 est associée à un taux de survie sur 5 ans de 100% alors que l’absence de cette galectine dans le noyau corrèle avec un taux de survie de 70%. Étant donné que la galectine-8 est exprimée sous deux isoformes, nous avons soulevé l'hypothèse que l’expression intranucléaire de la galectine-8 pourrait être spécifique à un isoforme. Afin de tester cette hypothèse, nous avons étudié le profil d’expression des deux isoformes de la galectine-8 dans des lignées cellulaires de cancer du sein présentant des sous-types moléculaires variables : MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231, SKBR3, Hs578t et T47D. Nous avons porté une attention particulière à la distribution de ces isoformes dans le cytosol et le noyau. Les résultats d’expressions transcriptomiques (par RT-PCR) et protéiques (par immunobuvardage de type western et imagerie confocale) ont révélé que les cellules du cancer du sein présentent un profil d’expression hétérogène, tant au niveau de l’ARNm qu’au niveau de la protéine. Les profils d’expression au niveau des ARNm et de la protéine diffèrent également pour une même lignée cellulaire. Les deux isoformes se retrouvent autant dans le noyau que dans le cytosol. De plus, la densité cellulaire ainsi que la présence de galectine-7 dans le milieu de culture exercent une modulation de l’expression des isoformes de lgals8 qui favorise une augmentation de l’isoforme moyen. Dans l’ensemble, ces résultats démontrent que la localisation intranucléaire de la galectine-8 ne semble pas être causée par des facteurs intrinsèques de la protéine. Des études sur les mécanismes de transport intranucléaire de la galectine-8 seront nécessaires pour mieux comprendre sa distribution intracellulaire et pour déterminer un lien de cause à effet avec le phénotype observé chez les patientes atteintes du cancer du sein.

Abstract

Using biopsies from women suffering from the triple-negative subtype of breast cancer, our team has recently found that nuclear localization of galectin-8 is associated with a 5-year survival rate of 100% while the absence of this galectin in the nucleus correlates with a survival rate of 70%. Since galectin-8 is expressed in two isoforms, it has been hypothesized that intranuclear expression of galectin-8 may be isoform-specific. In order to test this hypothesis, we studied the expression profile of galectin-8 isoforms in human breast cancer cell lines with variable molecular subtypes: MCF7, MDA-MB468, MDA-MB-231, SKBR3, Hs578t and T47D. A particular attention was paid to the distribution of these isoforms in the cytosol and the nucleus. Analysis of the transcriptomic (by RT-PCR) and protein expression (by western-type immunoblotting and confocal imaging) revealed that breast cancer cells exhibit a heterogeneous expression profile, both at the mRNA and protein levels. Moreover, the level of a given galectin-8 isoform did not always correlate with its mRNA level. We also found that both galectin-8 isoforms are found in the nucleus and the cytosol. In addition, the cell density as well as the presence of galectin-7 in the culture medium increased the expression of the smallest isoforms of lgals8. Overall, these results revealed that the nuclear/cytosolic ratio of galectin-8 in breast cancer cells is not dependent on the reportoire of isoforms. Further studies on the mechanisms regulating intranuclear transport of galectin-8 will be needed to better understand its preferential distribution in the nucleus in certain group of patients with breast cancer.

Type de document: Thèse Mémoire
Directeur de mémoire/thèse: St-Pierre, Yves
Mots-clés libres: galectine; galectine-8; isoformes; galectinome; cancer du sein; triple-négatif; expression; culture cellulaire; transcriptomique; immunobuvardage; Galectin; galectin-8; isoforms; galectinome; breast cancer; triple-negative; expression; cell culture; transcriptomics; western blot.
Centre: Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt: 21 nov. 2019 16:41
Dernière modification: 21 nov. 2019 16:41
URI: http://espace.inrs.ca/id/eprint/8514

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