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Sécrétion de la xylanase B1 par Streptomyces lividans par les systèmes Sec et Tat de sécrétion de protéines.

Gauthier, Céline; Lemay, Johanne; Morosoli, Rolf . Sécrétion de la xylanase B1 par Streptomyces lividans par les systèmes Sec et Tat de sécrétion de protéines. In: 3e édition, Congrès INRS-Institut Armand Frappier 2003, 6-8 novembre 2003, Stoneham.

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Résumé

La xylanase B1 (XlnB1) de Streptomyces lividans est une enzyme de 31-kDa qui est composée d’un domaine catalytique (XlnB2) de 21-kDa et d’un domaine d’attachement au xylane de 10-kDa. Ces deux domaines se replient séparément. La XlnB2 privée du domaine d’attachement au xylane a démontré la même activité que l’enzyme entière soit la XlnB1. La xylanase est sécrétée via le système Sec. On constate que les séquences primaires de la XlnB2 et de la xylanase C (XlnC) partagent 81% d’homologie et que la XlnC est sécrétée exclusivement via le système de sécrétion Tat. Dès lors, il paraissait particulièrement intéressant de vérifier si la XlnB1 et la XlnB2 pouvaient être sécrétées efficacement via le système Tat à l’instar de la XlnC. Pour ce faire, la séquence signal de la XlnC a été fusionnée aux gènes qui codent pour la XlnB1 et la XlnB2 et les niveaux de sécrétion obtenus ont été comparés à ceux mesurés lorsque les gènes xlnB1 et xlnB2 sont fusionnés à une séquence signal de type Sec. Les constructions génétiques utilisées dans ces expériences ont été placées sous le contrôle du promoteur de la xylanase A qui a été utilisé avec succès lors d’expériences précédentes. La production de XlnB1, avec un peptide signal de type Sec, a été 3 fois plus élevée qu’avec un peptide signal de type Tat. Ceci indique peut-être que les deux domaines de la XlnB1 ont été difficiles a replier ou qu’une protéine portant deux domaines se repliant distinctement, n’est pas sécrétée efficacement via le système Tat. En contraste, la XlnB2 a été aussi bien sécrétée par les deux systèmes de sécrétion, bien que la demi-vie du précurseur de type Sec soit d’environ 1.5 minutes en comparaison à 15 minutes pour le précurseur Tat ; en bout de ligne, la même quantité d’enzyme a été produite dans le surnageant de culture.

Type de document: Document issu d'une conférence ou d'un atelier
Informations complémentaires: Affiche scientifique
Mots-clés libres: -
Centre: Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt: 03 avr. 2018 15:41
Dernière modification: 03 avr. 2018 15:41
URI: http://espace.inrs.ca/id/eprint/6005

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