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Activité enzymatique phospholipase A2 de la protéine de structure VP1 du parvovirus porcin

Lacoste, Marie-Claude (2001). Activité enzymatique phospholipase A2 de la protéine de structure VP1 du parvovirus porcin Mémoire. Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Maîtrise en virologie et immunologie, 124 p.

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Résumé

Les acides aminés essentiels du site catalytique de la PLA2 sont très conservés parmi les PLA2 provenant de différents groupes, mais se retrouvent aussi dans la séquence de la partie unique de la protéine VPI des parvovirus. Il est donc possible que ces acides aminés forment aussi un site catalytique dans la capside des parvovirus. Il y aurait donc une activité enzymatique PLA2 dans la capside des parvovirus. Pour vérifier la présence d'une activité PLA2 dans la capside des parvovirus, plusieurs expériences seront effectuées.

Tout d'abord, à l'aide de protéines VPI provenant des capsides de deux parvovirus, le B 19 et le PPV, il sera possible de vérifier si, en présence de phospholipides, il y a présence de la réaction enzymatique attendue. Une fois la présence d'une activité enzymatique établie. Les mutations qui seront effectuées sur les acides aminés importants du site catalytique de la PLA2 dans la séquence du PPV, permettront de confirmer qu'il s'agit bien d'une activité PLA2 dans la capside de PPV. L'utilisation d'inhibiteurs de la PLA2 permettra d'appuyer les résultats obtenus.

L'importance d'une activité PLA2 pour le virus se situerait au niveau des premières étapes de l'infection: la liaison au récepteur et la pénétration du virus dans la cellule. Les mutations effectuées sur les acides aminés du site catalytique de la PLA2 de la capside permettront de vérifier si le virus conserve ou perd son infectivité lorsque les mutations diminuent ou suppriment l'activité enzymatique. Grâce à des transfections avec les clones infectieux sauvages ou possédant des mutations affectant les différents acides aminés du site catalytique de la PLA2, il sera possible d'évaluer l'importance de ces acides aminés pour l'infectivité des parvovirus.

Il est important dans ce projet de s'assurer que la capside du PPV possède une activité PLA2, que les mêmes acides aminés du site catalytique de la PLA2 sont ceux conférant au virus l'activité PLA2 et que cette activité joue un rôle dans les premières étapes de l'infection. Les résultats de ces expériences sont essentiels à la poursuite du projet. Ils permettront ensuite de comprendre les liens entre la présence d'une activité PLA2 sur la capside des parvovirus, la présence d'anticorps antiphospholipides chez les individus infectés avec le B 19 et chez les patients atteints de maladies auto-immunitaires comme l'arthrite rheumatoïde et le lupus et finalement 1' infection au B 19 comme précurseur de ces maladies.

Type de document: Mémoire
Directeur de mémoire/thèse: Tijssen, Peter
Mots-clés libres: -
Centre: Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt: 28 sept. 2016 14:34
Dernière modification: 28 sept. 2016 14:34
URI: http://espace.inrs.ca/id/eprint/4504

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