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Rôles des connexines dans les gonades mâles d'omble de fontaine (Salvelinus fontinalis), un marqueur de maturation

de Montgolfier, Benjamin (2009). Rôles des connexines dans les gonades mâles d'omble de fontaine (Salvelinus fontinalis), un marqueur de maturation Thèse. Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Doctorat en biologie, 296 p.

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Résumé

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La spennatogenèse est un processus nécessitant de nombreuses interactions entre cellules genninales et somatiques. Les jonctions lacunaires sont identifiées comme jouant un rôle important dans la communication cellulaire. Les jonctions lacunaires permettent le passage bi­directionnel de petites molécules (pr 1 kDa) entre cellules adjacentes. Ce sont des structures composées de deux com1exons, eux-mêmes constitués par six protéines oligomérisées autour d'un pore central, appelées connexines (Cxs). Panni ces protéines, la Cx43 est présente dans le testicule de rongeurs et d'humain et des études ont démontré qu'une baisse de Cx43 dans le testicule entraînait une diminution de la spennatogenèse, voire son inhibition complète. L'omble de fontaine est un salmonidé qui se reproduit chaque automne. Durant la spermatogenèse, les cellules gem1inales se développent de façon synchrone. Il devient alors aisé de suivre étape par étape ce processus, et d'étudier avec précision chaque stade de maturation des gonades. L'objectif principal de cette thèse était de déterminer si les Cxs régulent la spermatogenèse chez 1'omble de fontaine. Plus précisément, nous avons défini quatre sous­ objectifs : 1) identifier et localiser les connexines dans le testicule de truite arc-en-ciel ; 2) étudier l'impact des effluents municipaux sur les niveaux d'expression des ARNm des connexines chez l'omble de fontaine; 3) établir le lien entre les honnones stéroïdiennes et l'expression des connexines, chez l'omble de fontaine; et 4) étudier les mécanismes de régulation du promoteur de cx43. Les résultats obtenus ont pem1is d'identifier quatre Cxs possédant une expression et une localisation spécifique dans le testicule de la truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss) et de l'omble de fontaine (Salvelinus fontinalis) (Cx43, Cx43.4, Cx30 et Cx31). De plus, l'exposition d'ombles de fontaine à des effluents municipaux a pennis de montrer l'augmentation précoce des niveaux de Cx43 et Cx31 dans le testicule d'individus dont la spermatogenèse était initiée. Ces résultats suggèrent le rôle possible de la Cx43 comme marqueur précoce de la maturation. Les suivis des variations des hormones stéroïdes, des Cxs et des récepteurs aux androgènes, aux hormones thyroïdiennes et de la gonadotropine 1, ont pennis d'observer les niveaux des Cxs durant la spermatogenèse et de montrer in vitro que les niveaux de cx43 n'étaient pas régulés par la 11-CT, mais dépendant des niveaux d'AMPc (messager secondaire de la GtH 1) et de T3. Enfin, nous avons étudié le promoteur de cx43. Une séquence partielle de 607 pb de son promoteur a été séquencée. Des expériences de retardement sur gel, puis des expériences de transfection avec différents fragments du promoteur de cx43 d'omble de fontaine dans des cellules gonadiques de truite arc-en-ciel (RTG-2) ont démontré que la fixation de C/EBP et tr­ beta sur le promoteur activait 1'expression de cx43 confinnant ainsi les observations précédentes. En conclusion, ces travaux ont pennis d'identifier et de localiser pour la première fois ces quatre Cxs dans le testicule de salmonidés et de montrer que leur expression varie durant la spermatogenèse. Toutefois, la 11-CT n'a aucun effet sur les niveaux d'ARNm de cx43, à l'inverse de la FSH et de T3 qui semblent augmenter son expression dans le testicule d'omble de fontaine.

Type de document: Thèse Thèse
Directeur de mémoire/thèse: Cyr, Daniel G.
Co-directeurs de mémoire/thèse: Audet, Céline (lSMER-UQAR)
Informations complémentaires: Résumé avec symboles
Mots-clés libres: spermatogenese ; salmonide
Centre: Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt: 11 févr. 2013 16:27
Dernière modification: 28 mars 2017 21:29
URI: http://espace.inrs.ca/id/eprint/180

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