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Rôles divergents du récepteur orphelin Nur77 dans la régulation de l'apoptose

De Léséleuc, Louis (2005). Rôles divergents du récepteur orphelin Nur77 dans la régulation de l'apoptose Thèse. Québec, Université du Québec, Institut National de la Recherche Scientifique, Doctorat en virologie et immunologie, 161 p.

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Résumé

Nur77 (NGFI-B, TR3) est un récepteur nucléaire orphelin impliqué dans des réponses précoces à divers stimuli. Il remplit des fonctions biologiques multiples ct parfois opposées. Nur77 est essentiel à l'apoptose des cellules T lors de la sélection négative ct de l'activation par le ReT. Il semble également jouer un rôle dans la régulation de l'apoptose chez les cellules normales ou tumorales soumises à divers stimuli, dont des dommages à l'ADN. Dans cc cas, son activité serait régulée par sa localisation intracellulaire. Nur77 est également exprimé en réponse aux facteurs de croissance ct est abondant dans plusieurs tumeurs. De plus, son expression protège contre certains stimuli apoptotiqucs. Le but de cc projet de doctorat fut d'élucider les mécanismes de régulation de l'apoptose par Nur77. Le premier volet consistait à étudier la localisation de Nur77 lors de l'apoptose par transfection d'un fusion GFP dans des cellules HeLa. La localisation cytoplasmique de Nur77 n'a été affectée par aucun agent génotoxique. Toutefois, nous avons observé l'apparition rapide ct réversible de corps nucléaires suite à certains traitements. Les rayons UV, la camptothécine, la cisplatine et le peroxyde d'hydrogène ont provoqué l'apparition rapide(lt 4h) de corps nucléaires dans une majorité de cellules. En revanche, un traitement avec de l'étoposidc ou des rayons gamma n'a induit que peu ou pas de corps nucléaires après 16 h d'incubation. Une troncation de Nur77 en N-terminal a empêché la formation de corps nucléaires, alors qu'une délétion en C­ terninal n'a pas affecté la localisation. Les corps nucléaires ne se sont pas superposés à d'autres structures bien connues. Des inhibiteurs phannacologiques de voies d'activation ou de fonctions physiologiques n'ont eu aucun impact sur cc phénomène, qui fut observé dans d'autres types cellulaires. Cependant, l'inhibition de la transcription par l'actinomycine D ou le ORB a reproduit le même phénomène, ce qui porte à croire que ces structures sont la conséquence d'un stress transcriptionnel et non pas de dommages en tant que tels. La séquestration de Nur77 dans ces corps nucléaires a mené à une inhibition de son activité transcriptionnelle. Le second volet consistait à évaluer le rôle apoptotique de Nur77 dans un modèle cellulaire. Des cellules HEK293 exprimant de façon stable Nur77 ainsi qu'une forme dominante­ négative (DN-Nur77) ont été générées. Les cellules exprimant Nur77 étaient résistantes à l'étoposidc, la camptothécinc ct la thapsigargine. Fait intéressant, Nur77 augmentait l'apoptose par de hautes concentrations de FasL mais a diminué l'apoptose suite à un traitement combiné de faibles doses de FasL et de cycloheximidc. La localisation cellulaire de Nur77 ne fut pas affectée par aucun traitement. L'activité basale de NF-KB ct la transcription du gène clAP 1 furent amplifiées chez les cellules 293Nur77. Cette augmentation fut insensible à l'inhibition du protéasome. Des inhibiteurs de la liaison de NF-KB à l'ADN ont neutralisé l'effet anti-apoptotiquc de Nur77. Les cellules DN-Nur77 étaient pour leur part très sensibles à FasL ct également résistantes à la thapsigarginc, cc qui indique que Nur77 peut avoir un potentiel à la fois pro- ct anti-apoptotique dans la cellule. L'importance potentielle de Nur77 dans la physiologie des cellules normales et tumorales est discutée.

Type de document: Thèse
Directeur de mémoire/thèse: Denis, François
Mots-clés libres: apoptose ; cellule ; T
Centre: Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt: 26 sept. 2013 13:35
Dernière modification: 08 déc. 2015 15:02
URI: http://espace.inrs.ca/id/eprint/179

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