Analyse des régions promotrices des gènes xlnA, xlnB et xlnC de Streptomyces lividans, en utilisant le gène xylE de O. putide comme gène rapporteur.

Bah, Aliou (1994). Analyse des régions promotrices des gènes xlnA, xlnB et xlnC de Streptomyces lividans, en utilisant le gène xylE de O. putide comme gène rapporteur. Mémoire. Québec, Université du Québec, Institut national de la recherche scientifique, Maîtrise en microbiologie appliquée, 170 p.

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Résumé

S. lividans 1326 produit trois xylanases: A, B et C. L'activité promotrice des gènes xlnA, xlnB, xlnC, a été testée en fusionnant les fragments de ces gènes avec le gène xylE dans les vecteurs de fusion, piJ4083, un plasmide à nombre de copie multiple et pXE4, un plasmide à nombre de copie unique. Le gène xylE de Pseudomonas putida est un gène rapporteur qui code pour une enzyme, la catéchol dioxygénase (C230), qui convertit le catéchol incolore en un composé, le 2-hydroxymuconique semialdéhyde, de couleur jaune intense. Les colonies qui contiennent les promoteurs localisés dans les constructions plasmidiques et pouvant faire exprimer le gène xylE, deviennent jaunes, lorsque vaporisées avec une solution aqueuse de catéchol. Celles, sans activité promotrice restent blanches. L'activité des promoteurs a été d'abord testée par visualisation sur Pétris, en milieu minimal supplémenté avec 1% de glucose, 1% de xylane ou 1% de xylose, puis en milieu liquide SLAB contenant 1% de glucose, 1% de xylane ou 1% de xylose. Parmi les promoteurs des gènes xlnA, xlnB et xlnC testés, certains avaient une activité en milieu contenant du xylane ou du xylose. En présence du glucose, seuls les promoteurs des fragments xlnA/Sphl-Bglll et xlnC!Pstl-Sphl n'étaient pas réprimés. D'autre part, la distance entre les promoteurs testés et le gène xylE était inversement proportionnelle à la production de C230.

Type de document:	Thèse Mémoire
Directeur de mémoire/thèse:	Shareck, François
Mots-clés libres:	-
Centre:	Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt:	08 sept. 2018 21:49
Dernière modification:	19 mai 2023 18:59
URI:	https://espace.inrs.ca/id/eprint/7553

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