Développement de biosenseurs pour la détection de virus d'intérêt et mise en place de protocoles d'étude d'aptamères ADN.

Khalfaoui, Fatma (2016). Développement de biosenseurs pour la détection de virus d'intérêt et mise en place de protocoles d'étude d'aptamères ADN. Mémoire. Québec, Université du Québec, Institut national de la recherche scientifique, Maîtrise en Microbiologie Appliquée, 99 p.

Prévisualisation

PDF - Version publiée Télécharger (41MB) | Prévisualisation

Résumé

Les biosenseurs sont des outils de détection et de diagnostic présentant l'avantage d'être faciles et rapides d'utilisation et fiables. Afin de détecter des molécules d'intérêt, certains biosenseurs utilisent des acides nucléiques comme agent de reconnaissance couplés sur des fibres optiques qui traduisent l'évènement de reconnaissance en signal lumineux. Les aptamères sont des acides nucléiques synthétiques capables de lier spécifiquement des molécules, des bactéries, des virus etc. Dans ce travail, nous nous sommes intéressés, dans un premier temps, au développement d'un biosenseur utilisant des séquences d'ADN complémentaires à des génomes viraux comme sondes de reconnaissance. Il a été possible en effet d'obtenir un signal d'hybridation sur un modèle en silice représentatif de la fibre optique du biosenseurs sur lequel sont couplées les ADN sondes. Dans un second temps, nous avons cherché à développer des protocoles d'analyse de la liaison d'aptamères modèles à leurs ligands spécifiques. Plusieurs protocoles basés sur les modifications chimiques, la dialyse à l'équilibre et d'autres ont été testés. Des résultats prometteurs ont été obtenus lorsque la liaison de l'aptamère à son ligand est analysée par fluorométrie.

Biosensors are detection tools that present the advantage of being easy and rapid to use, and reliable. In order to detect molecules of interest, some biosensors use nucleic acids as recognition agents when coupled on fiber optics that translate the recognition event into light signal. Aptamers are synthetic nucleic acids capable of binding specifically molecules, bacteria, viruses, etc. Here we present, firstly, a biosensor development using DNA sequences that are complementary to viral genomes. It was indeed possible to detect DNA hybridization events on silica models. Secondly, we tried to developed protocols to analyze the binding event occurring between model aptamers and their specific ligands. Several protocols using chemical modifications, equilibrium dialysis and other approaches have been tested. Promising results were obtained when binding events were analyzed using fluorometry.

Type de document:	Thèse Mémoire
Directeur de mémoire/thèse:	Perreault, Jonathan
Mots-clés libres:	-
Centre:	Centre INRS-Institut Armand Frappier
Date de dépôt:	22 juill. 2024 19:34
Dernière modification:	22 juill. 2024 19:34
URI:	https://espace.inrs.ca/id/eprint/15850

Gestion Actions (Identification requise)

Modifier la notice