Phosphorylation du domaine N-terminal du précurseur de la proté

Phosphorylation du domaine N-terminal du précurseur de la protéine de la capside du virus de la mosaïque du chou-fleur.

Julie Champagne et Denis Leclerc

Centre de Recherche en Infectiologie, CHUQ, Pavillon CHUL, 2705 Boul. Laurier, Québec, Canada, G1V 4G2.

Le virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV) est un virus à ADN db de 8 kpb, appartenant à la famille des caulimoviridae. Le virus mature est constitué des trois formes majeures de la protéine de la capside (CP) de 44, 39 et 37 kDa, toutes générées par clivage protéolytique des extrémités N- et C-terminales du précurseur de la capside (pré-CP) de 58 kDa. L'extension N-terminale acidique de 76 acides aminés du pré-CP est clivée par la protéase virale (Torruella et al., 1989). La protéine de la capside est phosphorylée in vitro en présence de la caséine kinase II (CKII), enzyme associée au virus purifié, et de -ATP³²(Martinez-Izquierdo et al., 1987). Par contre, la fonction de la phosphorylation au cours du cycle viral est encore peu définie. Les sérines 82, 86 et 88 sont les principaux sites reconnus par l'enzyme et jouent un rôle essentiel dans l'infectivité virale (Chapdelaine et al., 2002). La mutation de ces trois sérines dans le contexte de la protéine (pIV^{1-265 S*82-86-88-A}) a permis de démontrer que la CP contenant l'extension N-terminale est plus efficacement phophorylée. La présence de neuf sérines supplémentaires dans le domaine N-terminal de 76 acides aminés du pré-CP suggère des sites additionnels pour la CKII. Cinq mutants ont été généré dans le contexte de la protéine 1-265^{S*82-86-88- A}par remplacement des sérines par des alanines et ce pour l'identification des sites cibles. Nous examinerons la capacité de la CKII associée au virus à phosphoryler les protéines de capside du CaMV recombinantes en présense de -ATP³². L'incorporation de ces mutations dans le virus infectieux permettra de déterminer l'effet de ces résidus sur la viabilité du virus. Nous discuterons du rôle possible de la phosphorylation de la capside lors de l'infection par le CaMV.